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RCA滚环扩增试剂盒
  • 英文名:rolling circle amplification
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AJ3702 100T 2500.00 加入购物车 咨询客服
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滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)是近几年发展起来的一种核酸恒温扩增方法。以环状DNA为模板,通过一个短的DNA引物(与部分环状模板互补),在phi29 DNA 聚合酶催化下将dNTPs转变成单链DNA,此单链DNA包含成百上千个重复的模板互补片段。这种方法不仅可以直接扩增DNA和RNA,还可以实现对靶核酸的信号放大,灵敏度达到一个拷贝的核酸分子,因此在核酸检测中具有很大的应用价值和潜力。 因其高灵敏度、高特异性和可操作性,RCA技术在基础研究、实际检测、医疗诊断及纳米材料等方面都有很好的应用,结合细胞原位检测、单核苷酸多态性SNPs,蛋白质分析、免疫芯片和全基因组的扩增等研究都能发挥其巨大的优势。
本试剂盒配备的phi29 DNA聚合酶具有链置换和连续合成特性,可连续合成长达70kb的DNA片段。另外,该酶具有3’→5’外切酶校读功能,合成的DNA片段保真性高。试剂盒配备的Random Hexamers为6碱基随机引物可对目标分子进行指数放大(通常放大10000倍)。
滚环扩增

主要特征

  • 高灵敏度:单引物RCA的扩增效率成指数扩大,可达104-105
  • 操作简单:恒温扩增,程序简单化。
  • 仪器简单:只需维持恒温的水浴锅。
  • 应用广泛:可广泛应用于基础研究和医疗诊断等领域。

组分

名称 100T
phi29 DNA Polymerase (20 U/μl) 50 μl
10×phi29 Buffer 1 ml
Yeast Pyrophosphatase (0.1 U/μl) 25 μl
10mM dNTP Mixture 200 μl
25XRandom Hexamer 100 μl

储存

-20℃可保存3年,避免反复冻融。

实例

1. 应用本试剂盒以pEasy质粒为模板, 30℃作用5h。泳道1-5是模板浓度分别为0.0004,0.004, 0.04,0.4,1 ng/μl ,泳道6-10分别为泳道1-5相对应的RCA产物用PstI酶切后的产物,M 为D10000 DNA Marker。

RCA滚环扩增试剂盒

2. 应用本试剂盒以人基因组为模板, 30℃作用5h。泳道1-6是模板浓度分别为 0.0004,0.002,0.004,0.04,0.4,1 ng/μl ,M 为D10000 DNA Marker。

RCA滚环扩增试剂盒

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